Посмертные изменения миокардиальных клеток и их судебно-медицинское значение

Литературные данные о трупном окоченении касаются в основном скелетной мускулатуры, хотя наблюдения свидетельствуют о том, что ему подвержены также мышечные клетки миокарда и гладкой мускулатуры. Состояние последних редко учитывается в судебно-медицинской практике, так как морфология трупного окоченения миокарда и гладкой мускулатуры мало изучена, и сведения по этому вопросу противоречивы, что побудило нас провести данное исследование.

Материал и методы. Изучен миокард (124 мужчины и 26 женщин) умерших скоропостижно от острой ишемической болезни сердца в возрасте от 30 до 70 лет.

Материал для гистологического исследования брали в сроки от 3 до 96 ч после наступления смерти, фиксировали в забуференном растворе нейтрального формалина и заливали в парафин. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином, по Ван-Гизону в сочетании с окраской эластических волокон резорцин-фуксином, железным гематоксилином Гейденгайна, кислым фуксином по методу Селье. Для выявления миофибриллярного аппарата неокрашенные и окрашенные препараты исследовали в поляризованном свете, полученные данные контролировали фазово-контрастной микроскопией. При подсчете площади, занимаемой миокардиальными клетками, находящимися в различных состояниях, использовали окулярную измерительную сетку, предложенную Г.Г. Автандиловым. Она состояла из одного большого и 4 маленьких квадратов, каждый из которых имел 25 точек. Площадь подсчитывали по большому квадрату, учитывая процент точек сетки, совпадающих с изучаемыми клетками. Для получения более точных данных измеряли до 40 квадратов в каждом препарате (400).

Результаты и обсуждение. Помимо изменений, характерных для ишемической болезни сердца, отмечено, что в сроки от 3 до 6 ч после наступления смерти мышечные клетки умеренно воспринимают различные красители и большинство их четко отграничены друг от друга. В них определялась поперечная исчерченность и продольная полосатость. Мышечные волокна почти вплотную прилегали друг к другу, пространство между ними было узкое. При исследовании фибриллярного аппарата мышечных клеток, окрашенных железным-гематоксилином Гейденгайна, а также с помощью поляризованного и фазово-контрастного микроскопов установлено, что все мышечные клетки хорошо воспринимали железный гематоксилин и проявляли фибриллярную структуру: в большинстве их выявлена правильная взаимно перпендикулярная ориентация внутриклеточных фибриллярных структур.

При исследовании препаратов, окрашенных железным гематоксилином Гейденгайна, и нативных препаратов, исследованных в поляризованном и фазово-контрастном микроскопах, обнаружено два типа клеток. Первый характеризовался уменьшением размера A-дисков, которые были представлены в виде узких полос, расширением 1-дисков, особенно по сравнению с A-дисками, и четким утолщением Z-полос. М-полосы в A-дисках не выявлялись. Z-полосы приближены друг к другу (рис. 1, см. вклейку). Клетки второго типа обладали противоположными признаками: A-диски оказ-ались увеличены (в некоторых из них можно было выявить М-полосы) и становились равными I-дискам или превышали их, Z-полосы были удалены друг от друга по сравнению с таковыми клеток первого типа (рис. 2, см. вклейку). Такие изменения наблюдались в первые часы после смерти по всей площади препарата. Описанные миокардиальные клетки следует рассматривать как находящиеся в состоянии трупного окоченения (первый тип) и расслабления (второй тип). Подсчет по измерительной сетке показал, что клетки в состоянии трупного окоченения занимали 62,2±2,4% площади препарата.

Рис. 1. Правильная ориентация в мышечных клетках фибриллярных структур. A-диски уменьшены, I-диски расширены.
Здесь и на рис. 2 окраска гематоксилин-эозином. Ув. 900.

Рис. 2. Мышечные клетки с расширенными A-дисками, в некоторых из них видны М-полосы.

В срок от 6 до 12 ч после смерти в мышечных клетках миокарда отмечались изменения, подобные описанным. Особенностью этого периода было увеличенное количество клеток с уменьшенными саркоме-рами (65,3±2,1% площади препарата).

Через 12—18 ч после смерти число клеток, находящихся в состоянии трупного окоченения и расслабления, было приблизительно одинаковым. Кроме того, имелось больше клеток с выраженной эозинофилиев саркоплазмы, в которых при окраске железным гематоксилином Гейденгайна обнаружено нарушение фибриллярной структуры миоцитов. и взаимно перпендикулярной ориентации поперечной исчерченности и продольной полосатости, а также неравномерное распределение гематоксилинового лака на А-дисках.

В сроки 18—24 ч после смерти уменьшалось количество клеток, находящихся в состоянии трупного окоченения, увеличивалось количество-клеток, находящихся в состоянии расслабления (63,3±1,7% площади препарата), а также имеющих неравномерно окрашенную саркоплазму, В отдельных миоцитах отмечалось ее набухание, нарушение фибриллярной структуры, утолщение сарколеммы, ядра становились вытянутыми, A-диски по ширине были равны I-дискам, М-полосы четко выявлялись,

К 36 ч после смерти гистологическая картина резко изменялась. При окраске гематоксилин-эозином большинство мышечных клеток выглядели набухшими, саркоплазма окрашивалась гомогенно, пространство между волокнами было расширено, границы клеток округлены. При окраске железным гематоксилином Гейденгайна, при поляризационной и фазово-контрастной микроскопии отмечалась резкая дезорганизация фибриллярных структур. Мышечные клетки элективно окрашивались железным гематоксилином Гейденгайна. Снижалось двулучепреломление внутренних фибриллярных структур и нарушалась ориентация их внутри клетки. Иногда можно было встретить единичные клетки в состоянии трупного окоченения и группы клеток в состоянии расслабления.

В наблюдениях, в которых материал был взят через 48 ч и более после наступления смерти, повсеместно отмечались изменения, характерные для внутриклеточного аутолиза, появление большого количества клеток с суданофильными гранулами в саркоплазме.

Приведенные данные согласуются с результатами, полученными Ю.М. Китаевым при морфологическом исследовании фибриллярного аппарата скелетной мускулатуры. Подтверждением их могут также служить экспериментальные работы по исследованию миокарда в различные сроки после наступления смерти.

Так, Qallo, исследуя миокард животных, отметил, что сразу после смерти мышечные волокна не изменены, а спустя 12 ч в нем появлялось большое количество клеток в состоянии сокращения, которое увеличивалось к 16 ч.

Oliveira и соавт. отметили, что по мере нарастания трупного окоченения сердечной мышцы в миокардиальных клетках как бы подчеркивается поперечная исчерченность и продольная полосатость, в период, разрешения окоченения замещающаяся зернистым распадом.

Полученные данные о неоднородности миокардиальных клеток в-ранние сроки после наступления смерти могут быть объяснены результатами ряда исследований, которые свидетельствуют об известной гетерогенности миокардиальных клеток. Можно предположить, что неодновременное наступление трупного окоченения мышечных клеток сердца; обусловлено этим. Развитие морфологических изменений миокардиальных клеток во времени зависит также от условий окружающей среды, что необходимо учитывать при установлении давности наступления смерти.    

Выводы

1. При гистологическом исследовании в миокарде обнаруживаются мышечные клетки в состоянии трупного окоченения и расслабления. При этом выявляется четкая периодичность количества этих клеток: в первые часы после наступления смерти клетки, находящиеся в состоянии трупного окоченения, превалируют над клетками, находящимися в состоянии расслабления. В дальнейшем число клеток в состоянии расслабления нарастает.
2. Трупное окоченение миокарда характеризуется четкой морфологической структурой миофибриллярного аппарата мышечных клеток и может рассматриваться как предшественник аутолиза.
3. Отсутствие трупного окоченения миокарда в первые часы после наступления смерти может свидетельствовать о прижизненном повреждении миокарда (миокардиодистрофии различного генеза), что имеет прикладное судебно-медицинское значение.