Диагностические показатели состояния каталазно-пероксидазной системы в танатогенезе алкогольных интоксикаций

Проведенное нами гистохимическое исследование состояния алкогольокисляющих систем при интоксикациях этанолом позволило выявить, что при длительном употреблении больших доз алкоголя происходит истощение основной системы его окисления— алкоголь дегидрогеназы. При этом существенную роль в утилизации алкоголя приобретают так называемые аварийные системы — каталаза-пероксидазная {КТ-ПО) и микросомальная этанолокисляющая система (МЭОС). Исследование этих систем на различных стадиях алкогольных интоксикаций имеет большое значение для дифференциальной диагностики отравления этанолом и скоропостижной смерти от заболеваний сердечно-сосудистой системы.

Гистохимические методы в судебно-медицинской экспертизе не нашли применения в виду сложности, трудоемкости, дефицита реактивов, хотя они имеют ряд преимуществ, так как позволяют установить состояние активности ферментов в каждом индивидуальном случае.

Нами была поставлена цель модифицировать применительно к задачам судебно-медицинской экспертизы методику определения актиности КТ и разработать критерии диагностики и дифференциальной диагностики отравления этанолом. Исследования проведены на материале 60 судебно-медицинских экспертиз трупов лиц, умерших от алкогольной интоксикации и ишемической болезни сердца (ранние вскрытия). Контролем служили случаи смерти от механической травмы при отсутствии алкоголя в крови.

Разработанный нами метод определения активности КТ включает несколько этапов: 1) быстрое получение стандартных блоков тканей; 2) фиксацию их в охлажденном до 4°С 4%-ном растворе формальдегида, забуференном ацетатом кальция (1,5%) при постоянном кондиционировании среды в течение 3 часов; 3) промывку блоков в 7,5% растворе охлажденной сахарозы; 4) изготовление серийных срезов толщиной 10 мк в криостате при температуре 25°С; 5) инкубацию в течение 30 минут свободных срезов в подогретой до 37° С смеси 5 мл этилового спирта, 20 мг ортодианизидина, 4,9 мл буфера трис-Н рН 9,0, 0,2 мл 3% Н2О2; 6) промывку в нескольких порциях водопроводной воды и постфиксацию в кальций-формоле. Влажные срезы монтировали на предметные стекла и заключали в желатиновый гель. Гистологическое исследование проводили традиционными методами с окраской гематоксилин-эозином.

В результате проведенной работы установлено, что при смертельной алкогольной интоксикации происходит очаговое угнетение активности каталазы. В случаях сердечной смерти отмечалось общее равномерное снижение активности каталазы во всех органах по сравнению с контрольными данными. В очагах ишемии миокарда активность отсутствовала полностью. При смертельной интоксикации этанолом выявлено перераспределение ферментов во внутренних органах с появлением очагов повышенной реакции, чередующихся с полями полного истощения. Эти изменения были наиболее выражены в ткани печени. Наряду с количественными, отмечались и качественные изменения, обусловленные токсическим действием этанола на клеточные структуры: полиморфизм зерен, скопление их в более крупные агрегаты, выход ферментного материала в межклеточные пространства, диффузное прокрашивание элементов тканей.

Полученные результаты показывают, что комплексное секционное, гистологическое и гистохимическое исследования позволяют выявить один из механизмов танатогенеза алкогольной интоксикации и дифференцировать ее со смертью от ишемической болезни сердца.