Определение половой принадлежности волос

Определение половой принадлежности волос человека можно производить посредством анализа телец Барра (полового хроматина) в ядрах клеток корней волос (Frankenberg, 1959; Schmid, 1967, и др.). Для установления половой принадлежности необходимо просмотреть не менее 100 ядер клеток корней волос. У женщин тельца Барра обнаруживаются приблизительно в 50% ядер клеток, у мужчин — в 2%.

Для исследования телец Барра мы использовали различные методики.

Сначала проверили метод раздавливания. Корни волос фиксировали 10 мин в жидкости Карнуа, затем окрашивали по Фельгену, причем гидролиз проводили в 1 и. растворе соляной кислоты при 60° С в течение 10 мин (Kiszely, 1964). После этого препарировали внешнее корневое влагалище и расплющивали его между предметным и покровными стеклами. Несмотря на тщательное препарирование, ткани часто наслаивались друг на друга, что затрудняло просмотр ядер клеток, даже при 1200-кратном увеличении, а иногда делало его вообще невозможным. Лишь в 1/3 исследуемых волос получены годные препараты. Такие же результаты давала и методика, в которой используются орсеин и уксусная кислота.

Рис. 1 Ядра в корне волос (заливка в метакрилат).

Поэтому, если у нас имелся лишь один или несколько волос, мы не решались применять метод расплющивания, чтобы не рисковать присланным материалом.

Заливка отдельного волоса в парафин с окраской серийных срезов также не обеспечивала достоверного дифференцирования, даже при условии маркировки корней. То же следует сказать и об описанном нами в 1969 году методе наклеивания смоченных каллокрилом корней волос на плексиглас, с последующим производством срезов.

Рис. 2. Ядра с тельцами Барра из корня волоса женщины (заливка в метакрилат, толщина среза 2 мк).

В связи с этим мы избрали более дорогостоящий метод заливки, который применяется при исследованиях с помощью электронного микроскопа (Reimer, 1967).

Фиксированные в жидкости Карнуа корни волос, окрашенные по Фельгену или орсеином, заливали метакрилатом (наиболее пригодна смесь равных количеств бутил- и метилметакрилата). Инициатором полимеризации служила 1—2% перекись бензоила. Окрашенные, например, по Фельгену в красно-фиолетовый цвет, корни волос хорошо просматривались в застывшей прозрачной смеси. Срезы толщиной 1—2 мк изготовляли с помощью ультрамикротома Ardenne и Westmeyer (1959) с механическим продвижением препарата. Из одного корня получалось не менее 30 срезов (рис. 1), причем ядра почти не наслаивались одно на другое. Делать сверхтонкие срезы не рекомендуется, поскольку одно и то же ядро будет попадать в несколько срезов. При слишком быстрой полимеризации метакрилата ядра на поверхности корня иногда вытягиваются в продольном направлении, мы их не подсчитывали, тем более что при большом числе срезов в этом не было необходимости. Этот артефакт можно устранить путем заливки в «микропал», а также предотвратить его возникновение, применяя так называемую предварительную полимеризацию, т. е. заливая в метакрилат, когда он еще не успел загустеть.

Преимущество этого метода заливки пластмассой заключается не только в получении большого числа хороших срезов одного корня, но и в возможности исследовать остатки корня, в которых имеется лишь несколько ядер. На рис. 2 видны ядра женского волоса с тельцами Барра.

Таким образом, как показали наши исследования, метод расплющивания целесообразно применять только если в распоряжении эксперта имеется значительное количество волос.

При наличии же единичных волос мы рекомендуем после окраски производить заливку в синтетическую среду, например, в метакрилат.