Доказательство и количественное определение ноксирона в трупе

Известны смертельные отравления небарбитуровым снотворным ноксироном (Ю.Г. Твалчрелидзе, 1964; Н.М. Кисвянцева, 1971, и др.), однако вопрос о диагностике отравления с помощью микрокристаллоскопических реакций освещен недостаточно.

В нашем наблюдении, несмотря на гнилостные изменения, не только удалось обнаружить ноксирон, но и произвести количественное определение.

Определение ноксирона в органах трупа¹

Обозначения: ++ резко положительный; + положительный; — отрицательный результат.
¹ Кристаллический налет на фаянсовой чашке дал положительные результаты хроматографического, спектрофотометрического и микрокристаллоскопического исследований.

Гр-ка О., 61 года, была обнаружена мертвой в ванне с теплой водой. Рядом найдена чашка со следами белых кристаллов.

При судебно-медицинском исследовании трупа обнаружено полнокровие внутренних органов и резкие гнилостные изменения.

Судебно-химически исследовали белый кристаллический налет на чашке и внутренние органы трупа (см. таблицу).

Ноксирон изолировали 3-кратным настаиванием биологического материала водой, подкисленной щавелевой кислотой, с последующей повторной экстракцией хлороформом.

По 2 мл каждого извлечения отбирали пипеткой для количественного определения. Оставшуюся часть хлороформного экстракта подвергали дополнительной очистке: после удаления хлороформа остаток обрабатывали 10 мл горячей воды (80°), раствор трижды извлекали хлороформом (по 5 мл). Полученные после удаления растворителя буроватые маслянистые остатки исследовали на ноксирон.

Очищенные извлечения исследовали хроматографией в тонком слое, микрокристаллоскопией, спектрофотометрией.

Хроматографическое исследование проводили на силуфоловых пластинках (7,5×15 см) в системе растворителей хлороформ — ацетон (9:1). Для проявления пластинки обрабатывали 0,02% хлороформным раствором дифенилкарбазона и раствором сульфата ртути в серной кислоте Наблюдаемые при исследовании внутренних органов. 2 пятна по положению на пластинке соответствовали ноксирону (Rf=0,50) и, вероятно, одному из его метаболитов (Rf=0,40) (см. таблицу).

Микрокристаллоскопические реакции. Остальную часть хлороформного экстракта, предназначенного для качественного исследования, переносили на 4 предметных стекла.

Сухие остатки исследовали: с концентрированной серной кислотой, 25% раствором аммиака, а также с растворами хлор—цинк—йода и йода в йодиде калия (А.В. Белова, Е.Д. Зинакова, 1966). Результаты представлены в таблице.

С йодидными реактивами кристаллизацию наблюдали уже через 10 мин. При перекристаллизации из концентрированной серной кислоты и 25% аммиака трудности возникали при исследовании почек; кристаллизация в этом случае шла очень медленно, а при воздействии 25% раствора аммиака не наблюдалась вовсе.

Спектрофотометрическое исследование проводили как для количественного определения ноксирона, так и для подтверждающей идентификации. Извлечения очищали хроматографически в тонком слое силикагеля (пластинки 9×12 см; силикагеля ЛСЛ₂₅₄ 3,6 г, гипса 0,18 г, дистиллированной воды 8,0 мл). Хроматографировали в описанных выше условиях, причем извлечения наносили на стартовую линию в виде полосы длиной не более 1 см параллельно «метчику» ноксирона.

Выделенный на хроматограмме ноксирон элюировали 96° этанолом, используя стеклянный фильтр № 4. Элюат исследовали на спектрофотометре СФ-4А в кюветах 1 см (раствор сравнения — 96° этанол).

Количественное определение проводили при λ_max=235 нм модифицированным методом Goldbaum и соавт. (Е.Д. Зинакова, 1971). Е^1см1%=802. Измеряли оптическую плотность раствора сначала в нейтральной среде (D₀), а затем в щелочной (D₁) после добавления в кювету 0,1 мл 1 н. спиртового раствора едкого кали. Результаты представлены в таблице.

Снятие спектров поглощения проводили в щелочном спиртовом растворе, длина волн 227—240 нм. Максимумы поглощения приведены в таблице.

Параллельно исследовали желудочно-кишечный тракт (навеска 100 г), извлекали хлороформно-спиртовой смесью (1:1) — метод Грусц—Харди. Однако извлеченное количество ноксирона (13 мг%), а также трудности, возникающие в процессе фильтрования, свидетельствуют о том, что данный метод изолирования ноксирона не обладает преимуществами перед изолированием подкисленной водой.

¹ 5 г желтой окиси ртути суспендировали в 100 мл дистиллированной воды, добавляли 20 мл концентрированной серной кислоты, охлаждали и доводили дистиллированной водой до 200 мл.