Определение продолжительности посмертного периода в пределах 1 недели по состоянию некоторых структур больших полушарий головного мозга

При экспертизе трупа часто стоит вопрос о продолжительности посмертного периода (ППП). Показано, что с течением времени после смерти изменяются астроциты и олигодендроглиоциты [4]. Природа посмертных морфологически изменении не одинакова. Они могут быть, в частности, связаны со статусом организма, воздействием окружающей среды, предшествующими смерти патологическими состояниями, в том числе и алкогольной интоксикацией [3, 7, 9, 10]. Поэтому необходимо иметь представление о степени связи всех названных факторов с признаками, которые подходят для суждения о давности смерти.

  Исследовалось белое вещество под корой больших полушарий из теменной области головного мозга трупов людей, погибших от разных причин: асфиксия от повешения, бронхопневмония, инфаркт миокарда, общее охлаждение организма, тяжелая травма груди, закрытые и открытые изолированные и комбинированные с другими травмами и заболеваниями черепно-мозговые травмы (ЧМТ), эпилептический статус. При ЧМТ исследовались отделы мозга, отдаленные от очага ушиба. Материал набирался двумя способами. В 19 случаях свободной выборки фиксация кусочков мозга проводилась в день исследования трупа, в других 11 случаях она проводилось также и после экспозиции в течение 2-6 суток во влажной камере при температуре окружающей среды, которую оценивали 3 степенями (от 15^оС до 18^оС, до 22^оС, до 25^оС). Срезы мозга окрашивали глицинкрезоловым красным (ГКК) с метиловым зеленым [3, 5]. Группировка исследуемого материала представлена в табл. 1.

При исследовании препаратов в каждом случае для конкретных суток оценивали в баллах (0 – практическое отсутствие,  1 – определяются в препарате, 2 – определяются в каждом поле зрения) выраженность некротических изменений (кариорексиса и кариолизиса) в астроцитах и олигодендроглиоцитах, отсутствие ячеек дренажной глии, появление особых глиоцитов (см. ниже). Эти признаки сравнительно редки для ранних сроков, поэтому сумма их, с диапазоном изменений от 0 до 8 баллов, составляет гистологический показатель ППП (ГПППП). Кроме того, определялся процент окрашенных ГКК эритроцитов в сосудах мозга. Затем проводился подсчет глиоцитов в 10 полях зрения (окуляр 15, объектив 40, бинокулярная насадка 1,5x). Всего изучено 780 полей зрения микроскопа: отдельно подсчитывались астроциты без отростков (амебоидные), зернистые (амебоидные с зернистостью в цитоплазме), с разным числом отростков, олигодендроциты без признаков центрального хроматолиза ядра (ХЯ) и с признаками ХЯ. Находилась сумма всех отростков астроцитов. Статистическую обработку исследования произвели с помощью программы STATISTICA версии 5.5.

При исследовании срезов головного мозга в его белом веществе определялась густая сеть глиальных волокон, между которыми находились сосуды и глиоциты (рис. 1, а). Последние приблизительно на 83% были представлены олигодендроцитами без ХЯ, а на 3% - олигодендроцитами с ХЯ. Остальные 14% от общего количества клеток составляли астроциты с различным количеством отростков (10%) или без них, характеризующиеся заметным объемом красной цитоплазмы. В некоторых случаях поздних сроков посмертного периода находились особые глиоциты - с зернистостью цитоплазмы, светлым ядром и крупным базофильным ядрышком (рис. 1, б). Через 4-6 суток после смерти обращало на себя внимание уменьшение доли эритроцитов, окрашенных ГКК, общего количества глиоцитов, олигодендроцитов и астроцитов с отростками, но увеличивалось количество амебоидных и зернистых астроцитов.

Сначала был применен корреспондентский анализ всей дисперсии признаков, который, не завися от исходных кодов, позволяет объективно сгруппировать причины смерти и ранжировать их соответственно последовательности проекции на главную ось, отражающую максимум информации о реальной дисперсии (именно поэтому в табл. 1 некоторые разные причины смерти отнесены к одной группе). Исходя из последовательности признаков этой проекции, проведена их перекодировка, и затем  использованы другие анализы. В ходе факторного анализа был исключен, как избыточная информация, признак количества этанола в крови, сильно коррелирующий с количеством этанола в моче, но уступающий ему по величине факторной нагрузки. Значимые регрессионные связи представлены в табл. 2 и 3, в которых даны коэффициенты В, позволяющие составить уравнение регрессии. В частности, для   ППП  (табл. 2):

Y = 36,6-0,34*Х₁-0,02*Х₂-0,002*Х₃-0,001*Х₄-0,02*Х₅+0,58*Х₆

где Y – ППП (сутки), Х₁ – температура (код табл. 1), Х₂–Х₅ – количества структур соответственно перечню табл. 2. в 10 полях зрения микроскопа при увеличении 15x40x1,5, Х₆ – ГПППП (баллы).

Как и ожидалось, судя по бета-коэффициентам и t-критерию, большой вклад в регрессию вносит ГПППП, составленный из баллов, отражающих деструкцию глиоцитов и потерю мозгом жидкости. По весу он соответствует остальным вместе взятым признакам, которые свидетельствуют о распаде отростков и тел глиоцитов. Игнорирование температурного фактора почти не отражается на точности регрессии, так как вклад его не велик, а вместо него учитывается доля окрашенных ГКК эритроцитов в сосудах мозга.

Многие исследователи отмечают прижизненные изменения олигодендроцитов  [1, 2, 12] и астроцитов [8, 13]. По нашим данным, возраст, причина смерти и этанольная интоксикация не влияют на суждение о продолжительности посмертного периода. Они не вошли в уравнения множественной регрессии ППП и связаны с изменениями либо не имеющими к нему никакого отношения, либо вносящими очень малый вклад в его регрессию. Регрессии этих факторов характеризуются малыми коэффициентами детерминации и большой величиной стандартной ошибки. В них заслуживают внимания лишь корреляции количества зернистых астроцитов с концентрацией этанола в моче (r = 0,48) и с возрастом (r = -0,24). Возрастные изменения глии отмечены и другими исследователями [11,12]. При алкоголизме описаны изменения ядерного хроматина глиоцитов [9]. Деструктивные изменения астроцитов описаны при острых алкогольных интоксикациях [6]. Наши данные дополняют эти сведения и обосновывают необходимость дальнейшего изучения влияния возраста и алкогольной интоксикации на глиоциты.

Выводы

1. По изменениям глиоцитов и эритроцитов в белом веществе больших полушарий мозга, окрашенного ГКК, можно судить о продолжительности посмертного периода в течение 1 недели.
2. Разнообразие причин смерти, предшествующая алкогольная интоксикация и возрастные особенности потерпевшего не препятствуют оценке продолжительности посмертного периода.

Таблица 1

Факторы, которые могли влиять на посмертные изменения  в головном мозгу в изученных случаях

Таблица 2

Результаты регрессионного анализа связей варианты ППП (сутки) с учетом температуры: R = 0,88; скорректированный RІ = 0,76; F(6,71) = 41,6;  p < 0,00000;  стандартная ошибка (m) регрессии = 0,81

Таблица 3

Результаты регрессионного анализа связей варианты ППП (сутки) без учета температуры: R = 0,88; скорректированный RІ = 0,75; F(6,71) = 39,6;  p < 0,00000;  Стандартная ошибка (m) регрессии = 0,83