Определение сроков сохранения 2- и 3-метилгидроксибензола в разлагающемся трупном материале

2- и 3-метильные производные гидроксибензола (орто – и мета- крезолы) широко применяются в органическом синтезе, известны как антисептики, консерванты, являются побочными продуктами коксово-газовых производных [1].

Являясь токсичными для человека, эти вещества при попадании в организм способны вызывать отравления различной степени тяжести, в том числе с летальным исходом [2].

Отдельные аспекты судебно-химического анализа рассматриваемых соединении разработаны недостаточно.

Цель настоящей работы – определение сроков сохранения 2- и 3- метилгидроксибензолов в трупном материале.

Готовили модельные смеси. Анализируемое вещество с мелкоизмельченной печенью от трупа человека в соотношении 1:1000 (по массе) и сохраняли их при температуре 18-20°С в стаканах, закрытых полиэтиленовой пленкой с отверстием диаметром 0,8-1 мм. В аналогичных условиях сохранялись контрольные образцы печени.

Определение того или иного метилгидроксибензола в сохраняемом трупном материале проводили через каждые сутки сохранения. При этом 25 г искусственной смеси заливали 50 мл этилацетата и выдерживали в течение 45 минут при периодическом перемешивании. Извлечение отделяли и процесс настаивания повторяли в вышеописанных условиях. Отдельные этилацетатные извлечения объединяли, фильтровали через стеклянный фильтр со слоем безводного сульфата натрия. Слой сульфата натрия дополнительно промывали 20 мл этилацетата. Фильтраты объединяли, растворитель испаряли. Остаток растворяли в 5 мл этилацетата. Определенную часть полученного раствора этилацетатного извлечения (0,1-1 мл) наносили на линию старта хроматографической пластины типа '' Силуфол '' UV-254 и хроматографировали в присутствии вещества-свидетеля, используя подвижную фазу гексан-эфир (6:4). Параллельно хроматографировали контрольное извлечение. После проявления хроматограмм в УФ-свете, исследуемое вещество элюировали из сорбента хлороформом (дважды порциями по 5 мл каждая), элюаты объединяли, хлороформ испаряли. К остатку прибавляли 1 мл воды, 1 мл 10 % раствора нитрата калия в концентрированной серной кислоте и нагревали реакционную смесь при 98-100°С в течение 10 минут. По истечении указанного времени смесь охлаждали, прибавляли к ней воду до 10 мл  (при исследовании 3-метилгидроксибензола) или 20 % раствор гидроксида натрия до рН 2-3 и воду до объема 20 мл (при исследовании сохраняемости 2-метилгидроксибензола) и экстрагировали диэтиловым эфиром  (дважды порциями по 20 мл). Эфирные экстракты в каждом случае объединяли, обезвоживали безводным сульфатом натрия, эфир испаряли. Остаток растворяли в 5 мл ацетона. 0,1-1 мл полученного раствора наносили на пластину "Силуфол" UV-254 и хроматографировали, используя подвижную фазу гексан-хлороформ (4:7) (при определении 3-метилгидроксибензола в виде его полинитропроизводного -3- метил-2,4,6- тринитрогидроксибензола) или подвижную фазу хлороформ-диоксан (7:3) при определении 2-метилгидроксибензола в виде его полинитропроизводного-(2-метил-4,6-динитрофенола)). Хроматограммы проявляли в парах аммиака. Соответствующие полинитропроизводные элюировали из сорбента диметилформамидом.

Идентификацию исследуемых веществ и их количественное определение осуществляли спектрофотометрическии  по особенностям поглощения диметилформамидных элюатов соответствующих полинитропроизводных в интервале длин волн 265-600 нм. Результаты количественного определения 2- и 3- метильных производных гидроксибензола в зависимости от сроков сохранения трупного материала представлены на рисунке. Как свидетельствуют полученные данные, 2-метилгидроксибензол удается обнаружить в течение 4 дней с момента начала эксперимента, на 6 день еще обнаруживается следы вещества; 3-метилгидроксибензол присутствует в сохраняемом биологическом материале значительно дольше и может быть определен по крайней мере в течение 64 суток.

Результаты изучения сохраняемости 2– и 3 – метилгидроксибензолов в трупном материале