Молекулярно-генетический анализ митохондриальной ДНК в обожженных костях: еще раз о пределах возможного

К.м.н. Е.Ю. Земскова¹, к.м.н. М.М. Бордюков¹, д.м.н., проф. А.В. Ковалев^1,2, д.б.н., проф. П.Л. Иванов¹

¹Отдел молекулярно-генетических экспертиз (исследований) Российского центра судебно-медицинской экспертизы (дир. — д.м.н. А.В. Ковалев) Минздрава России, Москва, Россия, 125284; ²кафедра судебной медицины (зав. — к.м.н., доц. А.Ф. Кинле) Российской медицинской академии непрерывного профессионального образования Минздрава России, Москва, Россия, 125993

Представлено иллюстративное исследование, продолжающее дискуссионный цикл о возможности получения достоверной генетической информации из обожженных костных объектов. Изучали аналитическую пригодность экспериментальных обожженных костных объектов для генотипирования митохондриальной (мт)ДНК с применением стандартной судебно-экспертной методики анализа полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ППАФ) мтДНК путем секвенирования с флуоресцентной детекцией. Показано, что приемлемое для генотипирования состояние мтДНК наблюдается в препаратах, полученных из костной ткани, подвергшейся только достаточно «мягкой» термической обработке, когда кость по внешнему виду почти не отличается от нативной. В случаях более «жесткого» температурного воздействия, когда кость демонстрирует выраженные внешние признаки термического воздействия, костную ткань следует признать заведомо непригодной для генотипирования мтДНК. Установили, что хромосомная ДНК уступает в аналитической устойчивости мтДНК. Это соответствует устоявшимся представлениям, однако, с точки зрения эффективности генотипирования, это преимущество мтДНК относительно невелико.

Ключевые слова: судебная молекулярно-генетическая экспертиза, генетическая идентификация, анализ митохондриальной ДНК в обгоревших костных останках.

The molecular-genetic analysis of mitochondrial DNA from the burnt bones: «the limits of the possible» problem revisited

E.YU. ZEMSKOVA¹, M.M. BORDYUKOV¹, A.V. KOVALEV^1,2, P.L. IVANOV¹

¹Department of Molecular-Genetic Expertise, Russian Federal Centre of Forensic Medical Expertise, Ministry of Health of the Russia, Moscow, Russia, 125284; ²Department of Forensic Medicine, Russian State Medical Academy of Continuous Professional Education, Ministry of Health of the Russia, Moscow, Russia, 125993

The authors report the results of the demonstrative study continuing the cycle of interactive discussions pertinent to the possibility of obtaining reliable genetic information from the analysis of burnt bone fragments. Special emphasis is placed on the worthiness of these materials for genotyping of mitochondrial DNA (mtDNA) with the use of the standard analytical methods employed for the purpose of forensic medical expertise to investigate into the length polymorphism of the amplified mtDNA fragments (PAF) by means of sequencing with fluorescent detection. The study has demonstrated that the mtDNA fragments in the state suitable for genotyping can be found only in the preparations from the bone tissue exposed to the «mild» thermal impact after which the affected bone is virtually indistinguishable from the native one as far as the outward appearance is concerned. In the cases of a more rigorous thermal impact when the bone tissue exhibits well pronounced signs of heat destruction, it should be considered as inherently unsuitable for genotyping of mtDNA. It was shown that chromosomal DNA is inferior to mtDNA in terms of heat resistance. This finding agrees with the currently adopted view, however this advantage of mtDNA is relatively insignificant from the standpoint of genotyping efficiency.

Keywords: forensic molecular-genetic expertise, genetic identification, analysis of mitochondrial DNA in burn bone fragments.

DOI: 10.17116/sudmed201861221-25