Потери морфина и стрихнина при судебно-химическом анализе

Для выделения алкалоидов из биологического материала в судебно-химических лабораториях СССР в основном применяют модифицированный метод Стаса—Отто и метод Васильевой. Однако оба они вследствие частичного разложения и потери на отдельных стадиях (неполное изолирование из биологического материала, адсорбция материалом фильтров и сопутствующими веществами в вытяжках, экстракция совместно с белками и продуктами их разложения при очистке вытяжек, неполная экстракция органическими растворителями из предварительно очищенных вытяжек и т. д. ) не позволяют выделять алкалоиды количественно.

Мы поставили задачу определить объем этих потерь для морфина и стрихнина.

Брали по 100 г печени из трупа человека, размельчали, прибавляли по 25 мг морфина гидрохлорида или стрихнина нитрата в водных растворах. Соли обоих алкалоидов соответствовали требованиям ГФIХ. Каждую пробу тщательно перемешивали, оставляли на сутки при комнатной температуре, затем из каждой пробы выделяли алкалоиды по методам Стаса—Отто или Васильевой.

Стрихнин и морфин, выделенные из биологического материала (Методическое письмо о выделении и количественном определении морфина, стрихнина и бруцина при судебно-химическом исследовании трупного материала. М., 1966), определяли на фотоэлектроколориметре ФЭК-М. Сухие остатки выделенных алкалоидов растворяли в 10 мл 0,1 н. раствора соляной кислоты и в растворах определяли алкалоиды. Морфии определяли таким образом: в мерную колбу емкостью 25 мл вносили 5 мл раствора кремнекислого калия (в 1 мл содержится 0, 2 мг кремния), 4 мл воды, 2 мл 0,5 н. раствора соляной кислоты и 2 мл 5% раствора молибдата аммония. Через 3 мин. прибавляли 1 мл исследуемого раствора, 4 мл воды, перемешивали, прибавляли 5 мл 6% раствора аммиака. Жидкость окрашивалась в синий цвет. Через 10 мин. объем доводили водой до метки и измеряли оптическую плотность (светофильтр красный 656 ммк, кювета 3, 053 мм, калибровочный график строится по правому барабану).

При определении стрихнина: в колбу вносили 1 мл исследуемого раствора, 3 мл воды, 1 г цинковой пыли и 6 мл соляной кислоты удельного веса 1, 12, закрывали пробкой, снабженной воздушным холодильником, нагревали на кипящей водяной бане до прекращения выделения пузырьков газа (15—20 мин.), охлаждали водой, прибавляли каплю 10% раствора нитрита натрия, количественно переносили в мерную колбу емкостью 50 мл, доводили водой до метки, измеряли оптическую плотность жидкости, окрашенной в оранжево-красный цвет (светофильтр синий 453 ммк, кювета 5, 045 мм, калибровочный график строится но правому барабану).

Результаты приведены в табл. 1.

Таблица 1

Количество морфина и стрихнина, выделенных методами Стаса — Отто и Васильевой из 100 г биологического материала

Чтобы выяснить потери на отдельных этапах анализа алкалоидов, мы дополнительно определяли морфин и стрихнин в фильтровальной бумаге, марле, через которые процеживали или фильтровали алкалоидные вытяжки. Использовали тот же биологический материал, из которого ранее выделяли алкалоиды. Определяли coдержание алкалоидов в хлороформе, с которым взбалтывали кислые вытяжки с целью их очистки от примесей белков я продуктов их разложения, и в осадках, скапливавшихся на фильтрах.

Таблица 2

Потери морфина и стрихнина (в %) за счет их адсорбции при выделении из биологического материала по методам Стаса — Отто и Васильевой

Указанные объекты настаивали трижды с водой, подкисленной щавелевой кислотой до pH 2,5 (12,2 и 1 час). Соединенные вытяжки подщелачивали аммиаком до pH 8,5 (морфин) или 10,0 (стрихнин), взбалтывали с хлороформом (3 раза по 50 мл). Соединенные хлороформные вытяжки выпаривали досуха, в остатках определяли морфин и стрихнин, как указано выше.

При определении морфина и стрихнина в хлороформе, применявшемся для очистки кислых алкалоидных вытяжек от примесей, его выпаривали досуха, остаток растворяли в 10 мл 0,1 н. раствора соляной кислоты и определяли эти алкалоиды. Результаты приведены в табл. 2.

Эти данные показывают, что при изолировании морфина и стрихнина из трупного материала по методу Стаса — Отто в ходе исследования за счет перехода в хлороформ из кислых вытяжек, а также адсорбции марлей, материалом фильтров, твердыми остатками на фильтре в процессе очистки кислых вытяжек потери для морфина составляют около 11,34—16,5%, для стрихнина — 16,8— 17,7%. Аналогичные потери при изолировании подкисленной водой по методу Васильевой для морфина были в пределах 13, 49—18, 04%, для стрихнина — 29,40—36%.

Потери, которые не удается определить в ходе анализа по методу Стаса — Отто, для морфина составляют около 70,4—72,5%, Для стрихнина — 63,3—67%; по методу Васильевой потери морфина составляют 64,36—71,44%, стрихнина — 34,4—43,4%. Это свидетельствует о несовершенстве обоих методов и, видимо, обусловливается связыванием или разложением алкалоидов в биологическом материале.

Выводы

1. Проверена пригодность методов Стаса — Отто и Васильевой для выделения морфина и стрихнина из трупного материала. Показано, что по методу Васильевой этих алкалоидов выделяется больше, чем по методу Стаса — Отто.
2. Определены потери морфина и стрихнина на различных этапах выделения. Установлено, что марля адсорбирует около 0,6—2,6% морфина и 0, 8—4, 0% стрихнина, материал фильтров — 0,8—1,8% морфина и 2—5, 6% стрихнина, твердые остатки, собранные с фильтров, — 7,7—14,4% морфина и 3,6—9,2% стрихнина. Из кислой алкалоидной вытяжки в хлороформ переходит около 0,5—1% морфина и 2, 5—4, 8% стрихнина.