Судебно-химическая характеристика промедола

Оригинальный советский препарат промедол (1,2,5-триметил-4-феннил-4-пропионоксипиперидин) вошел в медицинскую практику как заменитель морфина.

Для идентификации промедола при судебнохимических исследованиях мы пользуемся реактивом Марки, при добавлении которого происходит окрашивание в пурпурно-красный цвет с фиолетово-сиреневым оттенком. Эта реакция является для промедола наиболее специфичной и доказательной, так как опиаты иначе окрашиваются реактивами группы серной кислоты. Кроме того, при изучении отношения промедола, лидола и фенадона к общим реактивам на алкалоиды, действие которых основано на принципе окрашивания, нами установлено, что лидол не образует окрашенных продуктов с концентрированной серной кислотой, содержащей азотную, ванадиевую кислоты, формальдегид; фенадон же при добавлении реактива Манделина приобретает интенсивную синюю окраску.

Обнаружение промедола по общему ходу судебнохимического анализа

Изолирование промедола производилось подкисленным спиртом по методике в описании А.В. Степанова (Судебная химия, 1951, стр. 238—242.): 100 г тщательно измельченных внутренних органов кролика помещали в толстостенную колбу, добавляли определенное количество исследуемого вещества, хорошо перемешивали содержимое и сохраняли при температуре 25—30°; через сутки содержимое колбы заливали 96° винным спиртом и подкисляли виннокаменной кислотой; затем содержимое колбы энергично взбалтывали, не закрывая пробку, и через некоторое время, необходимое для нейтрализации оснований, испытывали на лакмус; при положительном результате колбу неплотно закрывали пробкой и оставляли на сутки в теплом месте, часто взбалтывая; через сутки вновь проверяли реакцию на лакмус, сливали спиртовую вытяжку и заменяли ее новой порцией спирта. Экстрагирование в каждом опыте повторяли трижды. Жидкость сливали, остаток помещали на складчатый фильтр и промывали спиртом, который присоединяли к слитым вместе порциям вытяжки.

Спиртовую вытяжку в количестве 350—420 мл отфильтровывали и сгущали в фарфоровой чашке на водяной бане, нагретой до температуры не более 40°, до консистенции сиропа. Для осаждения белков сироп обрабатывали 96° спиртом, приливая его по каплям и перемешивая жидкость стеклянной палочкой до тех пор, пока не прекращалось осаждение. Жидкость отстаивали, фильтровали и фильтрат снова упаривали до густоты сиропа в описанных выше условиях. В сиропообразном остатке повторяли осаждение белков, жидкость снова отстаивали и фильтровали.

Операцию осаждения белков повторяли до тех пор, пока при добавлении спирта осаждение прекращалось.

Вытяжку выпаривали до густоты сиропа, затем растворяли в 50 мл воды и подкисляли виннокаменной кислотой до ясно кислой реакции на лакмус, затем трижды выбалтывали хлороформом (последовательно брали по 10, 5 и 5 мл) осторожным переворачиванием делительной воронки 40—50 раз.

Хлороформную вытяжку из кислого раствора промывали 2—3 мл воды, фильтровали через сухой фильтр в фарфоровые чашки или на часовые стекла и испаряли при комнатной температуре; с остатками выполняли качественные реакции на наличие промедола. После очистки кислой водной жидкости хлороформом к ней добавляли раствор аммиака до ясно щелочной реакции на лакмус и повторяли операцию извлечения, описанную применительно к кислому раствору.

Очищенные остатки растворяли в хлороформе, переносили в фарфоровые чашки или на часовые стекла, испаряли и выполняли с ними качественные реакции.

Полученные результаты представлены в табл. 1.

Таблица 1

Обозначения в табл. 1, 2, 4: ++ резко положительная реакция; + положительная; X следы; — отрицательная реакция.

Из данных табл. 1 видно, что промедол по общему ходу судебнохимического анализа обнаруживается в щелочной вытяжке в количестве 0,3 мг на 100 г объекта и частично переходит в кислое извлечение (Фенадон экстрагируется из биологического материала животного происхождения подкисленным спиртом с последующим извлечением хлороформом или дихлорэтаном из кислого раствора в количестве 40 мг на 100 г объема (при добавлении реактива Манделина появляется интенсивное синее окрашивание)).

При замене хлороформа дихлорэтаном удается обнаружить 0,15 мг промедола на 100 г пробы, т. е. чувствительность определения увеличивается вдвое.

Описанная методика доказательства наличия промедола в трупном материале применима для обнаружения вещества в органах и тканях отравленных животных. Водный раствор промедола вводился кроликам в ушную вену из расчета 45 мг вещества на 1 кг живого веса. Животные погибали в течение нескольких минут от паралича дыхательного центра.

Из данных табл. 2 видно, что при отравлении кроликов со смертельным исходом в условиях острого опыта промедол обнаруживается в легких, почках и моче.

Таблица 2

Доказательство наличия промедола в органах и тканях отравленных животных

Сравнительная оценка методов изолирования промедола из биологического материала животного происхождения

Целесообразность использования (при анализе трупного материала на наличие и содержание ядовитых органических соединений) в качестве экстрагента подкисленной воды, по А. В. Степанову и М.Д. Швайковой (Фармакология и токсикология, 1943, № 5, стр. 55—58.), вытекает из следующих положений: а) исключается применение спирта — дорогостоящего экстрагента; в) длительность анализа сокращается до 2 рабочих дней.

Таблиц а 3

Сравнительная оценка методов изолирования промедола

Фенадон экстрагируется из биологического материала животного происхождения подкисленной водой с последующим извлечением хлороформом или дихлорэтаном из кислого раствора в количестве 10 мг на 100 г объекта.

В табл. 3 результаты экстрагирования промедола подкисленной водой сопоставляются с данными, характеризующими его извлекаемость подкисленным спиртом.

Сохраняемость промедола в трупном материале

Как видно из данных табл. 4, в гнилостном трупном материале промедол разрушается. Так, если на протяжении месяца обнаруживается 5 мг, то через 2 месяца — только 10 мг, а через 3 1/2 месяца — всего 100 мг вещества на 100 г объекта.

Таблица 4

Характеристика сохраняемости промедола в биологическом материале животного происхождения

Выводы

1. При судебнохимических исследованиях трупного материала на наличие промедола значение доказательства имеет появление в присутствии реактива Марки окрашивания пурпурно-красного цвета с фиолетово-сиреневым оттенком.
2. Промедол обнаруживается по общему ходу судебнохимического анализа в щелочной вытяжке в количестве 0,3 мг; при замене хлороформа дихлорэтаном чувствительность возрастает до 0,15 мг, при замене подкисленного спирта подкисленной водой удается обнаруживать 0,5 мг вещества на 100 г объекта. Следует иметь в виду, что промедол частично извлекается из растворов кислой реакции.
3. Промедол может быть обнаружен в гнилостном трупном материале, хранившемся на протяжении месяца, в количестве 5 мг, через 2 месяца— только 10 мг, а через 3 1/2 месяца — всего 100 мг на 100 г объекта.
4. Описанная методика доказательства наличия промедола в биологическом материале животного происхождения применима для обнаружения вещества в органах и тканях отравленных животных. При подозрениях на отравление промедолом прежде всего следует испытать ткань легких, почек и мочу.