Современное состояние некоторых вопросов судебномедицинской серологии (по литературным и собственным данным)

За последние 15 лет выявлено много новых факторов крови, что позволило подойти к изучению проблемы полной индивидуализации групповой характеристики человеческого организма.

В ряде стран изготовлены изо- и изоиммунные антисыворотки, выходящие за пределы системы АВО, MN и резус. В 1947 г. Уолш и Монтгомери (Walsh, Montgomery) нашли агглютинин анти-S в сыворотке женщины, дети которой перенесли гемолитическую желтуху.

Антитела анти-s, открытые в 1951 г. Левиным, Кумихель, Уигод и Кохом (Levine, Kuhmichel, Wigod, Koch), встречаются крайне редко как изоиммунные антитела. Гетероиммунных анти-S и анти-s сывороток до сих пор не получено. Соответственно этим антителам были обнаружены и агглютиногены S, s, входящие в систему MN. Фактор S чаще связан с агглютиногеном М.

Позже в результате иммунизации кроликов эритроцитами человека было выявлено еще два антигена — Hu (Hunter—Хантер), открытый Ландштейнером, Страттоном и Чезом (Landsteiner, Stratton, Chase), и Не (Henshow—Хеншоу), открытый Айкиным и Морантом (Ikin, Mourant). Оба эти антигена связаны с NS. Хотя агглютиногены М и N обнаруживаются в тканях, они никогда не выделяются с секретами организма. Антигены М2 и N2 описаны Фриденрейхом и Лауридсеном (Friedenreich, Lauridsen).

Эритроциты, содержащие этот антиген, не агглютинируются некоторыми сыворотками анти-М и анти-N, другими они агглютинируются хорошо.

Промежуточное положение между М и N занимает агглютиноген Мс , обнаруженный в 1953 г. Дансфордом (Dunsford), Айкиным и Морантом.

В 1958 г. Аллен, Коркоран, Кентон и Брир (Allen, Corcoran, Kenton и Breare) открыли фактор Mg; он не реагирует ни с анти-М, ни с анти-N сыворотками, но только со своими специфическими антителами. Встречается очень редко. Mg теоретически может служить для определения отцовства. Антиген Su (U), открытый Гринволтом (Green- walt) в 1956 г., встречается в крови у всех людей белой расы. У черной расы он иногда может отсутствовать; у последней могут быть антитела' анти- Su (см. Югевирт — Jugewirth).

Ряд новых антигенов также имеет отношение к MNSs-системе — это Vw, Mia , Wr [ван дер Харт, Холмэн, Сток (van der Hart, Holman, Stock)].

В 1960 г. Жэк (Jack) и др. описали еще один вид антигена Mi, а в1963 г. Клигхорн (Cleghorn) выявил еще 2 антигена St a n Ria , тесно связанных с системой MNSs.

Дар (Dahr) показал, что после контакта эритроцитов М с сывороткой анти-N можно получить слабо положительную пробу Кумбса (Coombs). Эритроциты N не содержат М, на это указывает отрицательный результат аналогичной пробы с сывороткой анти-М. Эритроциты N не содержат М, на это указывает отрицательный результат аналогичной пробы с сывороткой анти-М.

За последние годы появились работы Уленбрука (Uhlenbruck), Барановской (Baranowska) с соавторами и Романовской (Romanowska). Последние 2 — из лаборатории Гиршфельда (Hirschfeld). В этих работах путем химического анализа доказывается, что фактор М содержит также и агглютиноген N.

Из сказанного выше следует, что система MNSs сложная; в настоящее время в ней насчитывают около 17 агглютиногенов.

В 1940 г. Ландштейнер и Винер (Wiener) открыли в крови резус-фактор, встречающийся в эритроцитах у 85% людей. Вскоре после этого Винер и Петерс (Peters) показали, что в сыворотке человека могут содержаться антитела анти-резус и что они могут служить причиной носттрансфузионных осложнений.

В 1946 г. Мор ант в сыворотке одной женщины обнаружил агглютинин, не связанный с известными группами крови, и назвал его анти- Lea . Позже, в 1948 г., Андрезен (Andresen) нашел еще одно антитело, которое было названо анти-Ьеь . Агглютинины системы Льюис встречаются в крови людей Le (а—b—) как естественные или изоиммунные. Они могут быть полными или неполными Холодовыми антителами. В систему Льюис входят группы: Le(a+b—), Le(a—b+), Le(a—b—). Грубб (Grubb) указал на тесную связь системы Льюис с «выделитель- ством» АВН-субстанций. Все лица, имеющие в крови агглютиноген Le(a+), являются «невыделителями», а имеющие агглютиноген Le(b+)—«выделителями». Установленная связь между системой выделительства и системой Le имеет большое значение для судебной медицины. Данные о групповой принадлежности с учетом феномена выделительства могут играть роль в случаях исключения отцовства.

В том же 1946 г. Каллендер и Рэйс (Callender, Race) в крови больного волчанкой, получившего многократные гемотрансфузии, обнаружили антитело, определяющее группу Ласеран (Lutheran). Фактор Lua встречается редко, иммуногенные свойства его слабо выражены, поэтому сенсибилизация после переливания крови наблюдается редко. Предполагаемый агглютиноген Lub еще не обнаружен.

Антитела анти-Келл, обнаруженные Кумбсом, Морантом и Рэйсом в 1946 г. у женщины, родившей детей с гемолитической болезнью, послужили причиной для поисков соответственных антигенов. Это неполные антитела, они встречаются как изоиммунные и могут повести к тяжелым гемотрансфузионным реакциям при переливаниях крови. Антиген К обладает высокой активностью, он часто является причиной изоиммунизации матери плодом. Антитела анти-к-Челлано (Cella- по), открытые в 1949 г. Левиным, Вигодом, Бэкером (Levine, Backer, Wigod) и др., встречаются очень редко. Они являются причиной-осложнений при беременности. Система Келл — самостоятельная, но, по мнению некоторых авторов, связана с системой крови резус-

Катбаш, Моллисон и Паркин (Cutbush, Mollison, Parkin) описали фактор Fy (а + ) у больного, страдавшего гемофилией, которому было сделано неоднократное переливание крови. Интересно отметить, что у индейцев он отсутствует. Фактор Fy (b + ) открыт Айкиным, Морантом, Петтенкофером и Блументалем (Pettenkoffer,: -Blu- menthal).

Антитела системы Даффи чаще бывают неполные. Они могут явиться причиной тяжелых гемотрансфузионных осложнений.

Антигены Ik (а+), описанные Алленом, Даймондом и Ниедзела (Allen, Diamond, Niedzela), и Ik (b+), описанные Плот, Айкиным, Морантом, Сэнджер и Рэйс (Plaut, Sanger), встречаются часто.

Антитела системы Кидд—анти-1ка , часто неполные, нашли в сыворотке людей ван дер Харт и ван Логхем (van der Hart, van Loghem); анти-1кь встречаются в сыворотке людей крайне редко. Эти антитела вызывают реакцию при переливании крови.

За последние годы был обнаружен еще ряд широко распространенных антигенов — Fj (Джей), Vel (Вел), а также редко встречающихся— Levy (Леви)., Job (Джоббинс), Mi (Мильтенберг), Wr (Райт), Di (Дьего) и других, еще мало изученных. Антитела к этим антигенам, чаще неполные, появляются в результате несовместимости крови матери и плода.

Эти так называемые новые антигены могли бы иметь значение для диагностики крови в судебномедицинской практике, если бы имелись соответствующие сыворотки. Винер допускает возможность исследовать групповую принадлежность жидкой крови в отношении «новых» факторов: S, Р, Le и К- Системы Даффи, Кидд и др. он считает не пригодными для судебномедицинского исследования.

Институт судебной медицины первым в Советском Союзе начал проводить исследования в этой области. М. А. Бронникова с сотрудниками в 1956 г. приступила к выявлению новых факторов, а в 1957 г. Л.К. Аржелас, Е.С. Лутчева, М.Н. Резникова, М.И. Потапов и Н.А. Соловьева начали исследования по изысканию и выявлению в сыворотках людей антител к антигенам, не входящим в системы крови АВ0 и резус. С полученными из-за рубежа сыворотками выявлены положительные и отрицательные (по новым факторам) доноры для определения агглютининов и абсорбции сывороток. На 790 образцах крови выявлен процент лиц, содержащих новые факторы крови, произведено распределение агглютиногена Р по.группам крови (0, А, В и АВ).

Установлена возможность выявления изо- и изоиммунных антител в крови здоровых и больных, перенесших многократные гемотрансфузии. В исследованных сыворотках обнаружены антитела: анти-Кеа , анти-Бе1’, анти-S, анти-Lu и анти-Р с низкими титрами. В этот же период М. В. Мишакова из 85 свиных сывороток получила 10 с наличием агглютининов анти-Р с титром 1:2–1:4, т. е. непригодных для работы,, ,а в 1958 г. приготовила сыворотки анти-Р с титром 1:24–1:32, активные при комнатной температуре. Эти сыворотки внедрены в судебномедицинскую практику. В 1961 г. Л. К- Аржелас получила гетероиммунные сыворотки aHTH-Lea, обладающие неполными антителами с титром 1 :8–1 : 128, а в 1962 г. — сыворотки анти-Le® и анти-Le13 , содержащие полные антитела, и сыворотки aHTH-Leb с неполными агглютининами. Титр полных агглютининов aHTH-Lea доходил до 1:8. Титр сывороток aHTH-Leb с полными антителами в зависимости от группы применяемых стандартных эритроцитов колебался от 1 : 8 до 1 :32, а титр неполных антител aHTH-Leb был значительно выше (1:32–1:128), причем наиболее высокий титр был - с эритроцитами группы 0, более низкий — с кровью группы Ai- Полученные сыворотки активны при комнатной температуре, они хорошо выявляют агглютиногены системы Льюис в жидкой крови. Определение этих агглютиногенов в пятнах высохшей крови дало обнадеживающие результаты.

За рубежом в основном используют изо- и изоиммунные сыворотки aHTH-Lea и анти-Ееь с низкими титрами, реагирующие как холо- довые антитела. Пути дальнейшего изучения этого вопроса должны быть направлены на получение новых иммунных сывороток, как анти-S, анти-Fy, анти-Lu, анти-К и др., с дальнейшим внедрением их в практику. Получение таких сывороток даст возможность значительно расширить проведение судебномедицинских экспертиз и приблизиться к разрешению задачи по индивидуальной характеристике крови человека, что в свою очередь облегчит работу следственных органов в деле расследования преступлений.

Использование итогов изучения изосерологических систем в перспективе может привести к позитивному установлению отцовства (а не только к исключению его).

Кроличьи сыворотки анти-В получаются с трудом и не всегда обладают хорошей специфической активностью. В связи с этим Н. А- Соловьева (Институт судебной медицины) получила одноименные бараньи сыворотки с более высокой активностью. Определение групповой принадлежности слюны «невыделителей» гемагглютинирующими сыворотками анти-А и анти-В не всегда удается. Посредством иммунизации кроликов слюной лиц группы А или В М. В. Мишаковой удалось изготовить так называемые «слюнные» сыворотки, хорошо выявляющие группу А в слюне «выделителей» и «невыделителей». Однако группа В в слюне определяется так же нечетко, как и изосыворотками. Бараньи сыворотки анти-В и «слюнные» сыворотки анти-А и анти-В внедряются в судебномедицинскую практику.

Остановимся вкратце на лиофильном высушивании сывороток.

С целью получения стойких сухих сывороток в Институте судебной медицины проделана большая работа по высушиванию гемагглютини- рующих сывороток и изучению их свойств при длительном хранении.

Исследования показали, что высушивание из замороженного состояния не изменяет свойств жидких сывороток и длительно сохраняет их. Сухие сыворотки можно заготавливать впрок, они удобны для транспортировки.

Следующий вопрос, который заслуживает внимания с теоретической и практической точки зрения,— это фитагглютинины.

Потребности в разнообразных сыворотках как для теоретических разработок, так и для практического их использования в настоящее время не удовлетворяются полностью в большинстве стран мира в силу ряда затруднений медицинского, экономического и организационного порядка. Отсюда понятен значительный интерес к любой реальной возможности изготовления специфичных реагентов к антигенам человека, животных и рыб другим путем, помимо существующего, т. е. не из сывороток.

Таким путем, как показывают результаты научных исследований за последние 10 лет, является использование гемагглютинирующих и преципитирующих свойств экстрактов из семян некоторых растений.

Интенсивные поиски специфичных растительных антител и многостороннее изучение их свойств начали осуществляться только с 1948 г., после обнаружения Ренконеном (Renkonen) изолированных антител к агглютиногенам Н(0) и А эритроцитов человека в семенах растений семейства бобовых. К настоящему времени имеется довольно обширная литература (в основном зарубежная) по вопросу о растительных антителах, в результате изучения которой можно прийти к выводу, что перспективность изучения растительных антител, их значительная экономичность, техническая простота получения оценены должным образом во многих крупных серологических и гематологических лабораториях мира. Эти антитела уже используют для практических нужд службы переливания крови, судебной медицины, а также для научных исследований в области антигенной дифференцировки организма человека и животных.

К настоящему времени специфичные фитогемагглютинины получены к группоспецифическим мукоидам человека Н, А, В, N, D и к антигену Форемана. Пока еще не найдено растительных антител со свойствами истинных агглютининов анти-0, описанных Морганом и Уоткинсом (Morgan, Watkins), в отношении сывороточных антител, а также агглютининов анти-М.

Фитагглютинины анти-Н обнаруживаются значительно чаще других и применяются для определения фактора Н в жидкой и высохшей крови, степени «выделительства» этого агглютиногена в разных секретах организма человека и для выявления подгрупп Ai и Аг в эритроцитах групп А и АВ.

Фитагглютинины анти-А по частоте обнаружения занимают второе место; их используют преимущественно для выявления агглютиногена А и его подгрупп в жидкой крови, причем эти агглютинины настолько эффективны по сравнению с соответствующими сыворотками, что авторы рекомендуют использовать их как для клинических, так и для судебномедицинских целей.

Фитагглютинины анти-В и анти-N встречаются редко.

Использование растительных антител не только способствует более разностороннему изучению известных антигенов, но и приводит к открытию новых. Так, Бойд (Boyd) с соавторами при помощи экстракта из арахиса открыл новый агглютиноген в эритроцитах человека, названный им Gy (Джи) и передающийся по наследству.

В семенах софоры японской М. И. Потапов выявил неполное, типа агглютиноида, парциальное антитело анти-В. Сывороточное антитело с аналогичными свойствами еще не получено.

К концу 1961 г. в Институте судебной медицины М. И. Потаповым получены все основные фитагглютинины, известные к настоящему времени за рубежом. Тем самым созданы предпосылки для изучения лектинов при непосредственном использовании их в судебномедицинских целях. В этой области предстоит значительная работа, в процессе которой необходимо выяснить ряд вопросов в отношении свойств полученных фитагглютининов и разработки наиболее рациональных и эффективных методик их получения. Предстоит также выявить те области судебномедицинской экспертизы вещественных доказательств, в приложении к которым растительные антитела будут более эффективны, экономичны и просты, чем соответствующей специфичности сывороточные агглютинины. Изучение вопросов, связанных с исследованием фитагглютининов и внедрением их в практику, потребует многолетних исследований.

И, наконец, немало внимания уделяется изучению иммунизатор- ной реактивности организма под влиянием антигенных раздражителей.

Этим вопросом занимались многие отечественные ученые (П.Ф. Здродовский, К.Т. Халяпина, А. А. Климентова, Д.Ф. Плецитый, А.Н. Гордиенко, М.И. Райский и др.). Повышение иммунологической реактивности в связи с увеличивающимся спросом на сыворотки, помимо теоретического интереса, имеет также большое практическое значение.

В результате такого изучения удалось доказать, что в динамике иммунитета происходит чередование резистентности организма с иммунизаторной депрессией, а наибольшая напряженность иммунитета выражена у реиммуиизированных животных; при всех методах первичной иммунизации реиммунизация ведет к увеличению продукции агглютининов.

Работы, проведенные в этом направлении М.Н. Резниковой совместно с П.Н. Косяковым, показали, что способность организма отвечать выработкой преципитинов зависит от повторяемости иммунизаторного раздражения, вызываемого одним и тем же видом антигена. Повышение иммунологической реактивности в результате отдаленной реиммунизации отмечается у кроликов вне зависимости от видовой специфичности антигена, примененного для иммунизации, хотя способность организма вырабатывать преципитины зависит не только от индивидуальных особенностей организма, но и в значительной мере от видовой специфичности антигена, взятого для иммунизации. В этих работах также выявлено, что кролики чаще отвечают образованием побочных преципитинов по отношению к сывороточным белкам, имеющим наиболее близкое антигенное сходство с протеинами, взятыми для иммунизации. С целью повышения иммунизаторной реактивности организма изучали влияние стимуляторов — фенамина и кофеина — на продукцию антител (преципитинов и агглютининов). Оказалось, что введение указанных стимуляторов ведет к усилению процесса образования как преципитинов, так и агглютининов у большинства кроликов (JT. К. Аржелас, М. В. Мишакова и Н. А. Соловьева).

Принимая во внимание интенсивность разработки указанных вопросов в иммунной серологии за последние 10–15 лет и намечающиеся новые аспекты изучения лектинов с практическим применением их, можно выразить уверенность, что приведенные основные направления неинфекционной иммунологии и в дальнейшем будут плодотворн® развиваться и окажут существенную помощь для дальнейшего развития судебномедицинской экспертизы вещественных доказательств.

ЛИТЕРАТУРА

Алымов А.Я., Плецитый Д.Ф. В кн.: Проблема реактивности в патологии. М., 1954, стр. 9. — Аржелас Л.К., Мишакова М.В. В кн.: Сборник трудов сотрудников Бюро Главной Казахск. республиканской суд.-мед. экспертизы. Алма- Ата, 1958, в. 2, стр. 92. — Аржелас Л.К., Лутчева Е.С., Резникова М.Н. В кн.: Сборник трудов научно-практической конференции патологоанатомов и судебных медиков Пермской области. Пермь, 1959, стр. 9 9 . — Аржелас Л.К. В кн.: Вопросы судебной медицины. М., 1959, стр. 140.— Аржелас Л.К., Лутчева Е.С., Резникова М.Н. и др. Суд. мед. эксперт., I960, № 1, стр. 27. — Аржелас Л.К. В кн.: Сборник трудов 4-й Всесоюзн. конференции судебных медиков. Рига, 1962, стр. 345. — Она же. Суд. мед. эксперт., 1962, № 4, стр. 37.— Бронникова М.А., Багдасаров В.А., Барсегянц Л.О. Суд. мед. эксперт., 1958, № 3, стр. 1 9 . — Тордиенко А.Н. Нервнорефлекторный механизм выработки антител и регуляция фагоцитоза. М., 1954, стр. 51; 1 0 4 . — Здродовский П.Ф. Проблема реактивности в учении об инфекции и иммунитете. М., 1950, стр. 118.— Он же. Современное состояние экспериментальной иммунологии и ее ближайшие задачи. М., 1956, стр. 18 . — Косяков П.Н. Антигенные вещества в организме и их значение в биологии и медицине. М., 1954, стр. 94. — Косяков П.П., Резникева М.Н. Бюлл. экспер. биол., 1956, № 10, стр. 49; № 11, стр. 45.— Они же. Успехи совр. биол., 1955, т. 40, в. 3, стр. 320. — Климентова А.А. В кн.: Вопросы инфекционной патологии и иммунологии. М., 1954, в. 2, стр. 4 8 . — Мишакова М.В. Суд. мед. эксперт., 1960, № 1, стр. 32. — Она же. Там же, 1961, № 2, стр. 35.— Потапов М.И. Суд. мед. эксперт., 1961, № 3, стр. 20. — Он же. В кн.: Сборник трудов по судебной медицине и судебной химии. Пермь, 1961, стр. 145. — Он же. Тезисы докл. 2-й расширенной конференции Ленинградск. отд. Всесоюзн. научного о-ва судебных медиков и криминалистов. Л., 1961, стр. 229. — Он ж е. В кн.: Сборник трудов 4-й Всесоюзн. конференции судебных медиков. Рига, 1962, стр. 349.— Райский М.И. Харьковск. мед. ж., 1915, т. 9, стр. 169.—Он же. Там же, стр. 161.— Соловьева Н.А. В кн.: Сборник трудов по судебной медицине и судебной химии. Пермь, 1961, стр. 152. — Она ж е. В кн.: Сборник трудов 4-й Всесоюзн. конференции судебных медиков. Рига, 1962, стр. 337. — Халяпина К.Т. В кн.: Вопросы инфекционной патологии и иммунологии. М., 1954, в. 2, стр. 7. — Allen F. Jr., Diamond L.К., Niedzela В., Nature, 1951, v. 167, p. 482. — Allen F. Jr., Corcoran P.A. et al., Vox Sang. (Basel), 1961, v. 5, N 5, p. 228. — Allen F. Jr., Corcoran P.A. Kenton И.B. et al.. Ibid., 1958, v. 3, p. 81. — Andresen P.H., Acta path, microbiol. scand., 1948, v. 25, p. 728.—Andresen P.H., Henningsen K. Acta haemat. (Basel), 1951, v. 5, p. 123. — Callender S.Т., Race R.R., Ann. Eugenics., 1946, v. 13, p. 102. — Сleghorn Т.E., Nature, 1962, v. 195, p. 297. — Boyd W.C., Boyd L.G., J. Immunol., 1934, v. 26, p. 489. — Baranovski Т., Lisovska E., Romanovska E., Arch. Immunol. Ter. dosw., 1956, т. 4, стр. 45.— Cutbush М., Mollison P.L., Parkin D.М., Nature, 1950, v. 165, p. 188.— Coombs R.R.A., Mourant A.E., Race R.R., Lancet, 1946, v. 1, p. 264.— Da hr P. В кн.: Proceedings of the Seventh Congress of the International Society of Blood Transfusion. Basel, 1959, p. 155.— Dunsford I., Ikin E.W., Mourant A.E., Nature, 1953, v. 172, p. 688. — Friedenreich V., Dtsch. Z. ges. gerichtl. Med., 1953, Rd. 25, S. 358. — Friedenreich V., Lauridsen A., Acta path, microbiol. scand., 1938, Suppl 38, p. 155. — Grubb R., Nature, 1948, v. 162, p. 933.— Holman C.A., Lancet, 1953, v. 2, p. 119. — Ikin E.W., Mourant A.E., Pettenkoffer H.J. et al., Nature, 1951, v. 168, p. 1077. — Ikin E.W., Mourant A.E., Brit. med. J., 1951, v. 1, p. 456. — Kerde Chr., Brunk R., Fiinfhausen I., Prokop O. Zschr. f. Immunitfsch. expl. Therapie, Bd. 119, H. 5 . — Landsteiner K., Wiener A.S., J. exp. Med., 1941, v. 74, p. 309. — Landsteiner K., Strutton W.R., Chase M.W., J. Immunol., 1934, v. 27, p. 469. — Levine P., Backer М., Wigоd M. et a!., Science, 1949, v. 109, p. 464. — Levine P., Kuhmiсhе1 A.B., Wigоd M. et al., Proc. Soc. exp. Biol. (N. Y.), 1951, v. 78, p. 218. —Mоrgan W.T.J., Watkins М., Brit. J. exp. Path., 1948, v. 29, p. 159. — Levine P., Stock A.H., Kuhmichel A.B. et al., Proc. Soc. exp. Biol. (N. Y.), 1951, v. 77, p. 402. — Mourint A.E., Nature, 1946, v. 158, p. 237. — P1aut G. et al., Nature, 1953, v. 171, p. 431. — Rosenfield R.E., Haber G.V., Schroeder R. et al ., Am. J. hum. Genet, 1960, v. 12, p. 143. — Renkonen К.O., Ann. Med. exp. Fenn. 1948, v. 26, p. 66. — Romanovska E., Naturwissenschaft, 1960, Bd. 47, S. 66. — Sanger R., Race R., Rosenfield K., Vogel P., Vox Sang. (Basel), 1953,. v. 3, p.71, — Uhlenbruck G., Zbl. Bakt. I, Abt. Orig., 1961, Bd. 181, S. 283. — Van der Hart M. et tl., Vox Sang. (Basel), 1954, v. 4, p. 108. —Wa1sсh R. J., Montgomery С.М., Nature, 1947, v. 160, p. 504.—Wiener A., Peters. Цит._ S. Haberman et al, Blood, 1948, v. 3, p. 682.