Патоморфологические изменения в слизистой оболочке желудка при геморрагической лихорадке с почечным синдромом и их связь со свободным радикальным окислением

В патогенезе ведущим звеном при геморрагической лихорадке с почечным синдромом (ГЛПС) является генерализованное поражение микрососудов органов и систем [3, 4, 5, 6]. Морфологическое изучение механизмов повреждения слизистой оболочки желудка (СОЖ) при ГЛПС, их связи со свободнорадикальным окислением до настоящего времени не проводилось.

Целью настоящей работы явилась оценка взаимосвязи морфологических изменений в СОЖ при ГЛПС и показателями свободно-радикального окисления.

Материалы и методы.

Гастробиоптаты 8 больных с ГЛПС, полученные в сроки от 6 до 21 суток от начала клинической манифестации ГЛПС по поводу расстройств с гастродуоденальной симптоматикой, фиксировали в 10 % нейтральном формалине и заливали в парафин. Серийные срезы окрашивали гематоксилином Эрлиха и эозином, нейтральные мукополисахариды выявляли PAS-реакцией.

Оценку биогенеза свободных радикалов в гомогенизированных биоптатах слизистой оболочки желудка осуществляли методом хемилюминесценции (ХМЛ). ХМЛ регистрировали на люминесцентном спектрометре LS 50B “PERKIN ELMER”. Алгоритм ХМЛ-исследования свободнорадикального статуса включал определение следующих параметров интенсивности спонтанного и активированного свечения биосубстрата [2]: Ssp – светосумму за 1 минуту спонтанной ХМЛ, величина которой прямо коррелирует с интенсивностью процессинга свободных радикалов; h – максимум амплитуды быстрой вспышки Fe2+-индуцированного свечения, свидетельствующий о содержании гидроперекисей липидов; Sind-1 – светосумму за 2 минуты Fe2+-индуцированной ХМЛ, отражающую скорость образования перекисных радикалов преимущественно липидной природы; Slum – светосумму за 1 минуту люминолзависимой ХМЛ, свидетельствующую об интенсивности продукции гидроксил-радикала; Н – максимум амплитуды Н2О2-индуцированного люминол-зависимого свечения, величина которого обратно коррелирует с перекисной резистентностью субстрата; Sind-2 – светосумму за 2 минуты Н2О2-индуцированной люминолзависимой ХМЛ, величина которой обратно коррелирует с активностью антиоксидантной антирадикальной системы защиты. Интенсивность ХМЛ, измеренную в милливольтах, рассчитывали на 1 г влажной ткани и выражали в относительных единицах.

В серийных срезах печени в 10 полях зрения методом случайного бесповторного отбора полей зрения при увеличении в 200 раз полуколичественно определялись относительные площади удельных объемов лимфоидномакрофагальных клеточных инфильтратов, некротизированных участков СОЖ, количество эрозий и кровоизлияний [1].

Статистическую обработку полученных результатов проводили методами непараметрической статистики с помощью коэффициента ранговой корреляции Спирмена в программе Statistica 6.0.

Результаты исследования.

На нашем материале у больных ГЛПС в разгар заболевания при гастроскопии в области тела, кардиального и антрального отделов желудка выявлялось утолщение слизистой оболочки за счет гиперемии и отека. Местами складки рельефные с мелкоточечными кровоизлияниями, острыми эрозиями и язвами. При световой микроскопии изменения в желудке носили диффузный характер, захватывали поверхностные и глубокие слои. Преобладали дистрофические изменения и некрозы преимущественно поверхностных эпителиальных структур, очаговые кровоизлияния в строму. Эпителий желудочных валиков и ямочный эпителий представлен высокими цилиндрическими клетками с пикнотическими ядрами, располагающимися в базальной части. В поверхностно-ямочном эпителии найдены признаки гиперсекреции: значительный слой ШИК-позитивного муцина, который располагался на поверхности клеток. В собственном слое слизистой оболочки желудка выявлялись отек стромы, гиперемия и стазы в микроциркуляторном русле, очаговые кровоизлияния, полиморфно-клеточная инфильтрация.

Микроскопическое исследование: дно эрозий покрыто слизью и фибрином, инфильтрировано ПМЯЛ. Кроме того, выявляется гиперемия сосудов, стазы, сладжи эритроцитов с микротромбами в микрососудах стромы.

Острые язвы выглядят как овальные дефекты слизистой оболочки, дно их серовато-красное, в отдельных язвах видны аррозированные сосуды. При гистологическом исследовании дно язв представляло собой некротические массы, пропитанные фибрином и инфильтрированные полиморфно-ядерными нейтрофилами. Под некротическими массами обнаруживались зоны фибриноидного некроза, грануляционной ткани.

Отмечены выраженные дистрофические и некротические изменения клеток СОЖ в сочетании с признаками очаговой гиперплазии покровно-ямочного эпителия и началом переключения дифференцировки эпителиальных клеток в сторону мукоцитов на фоне усиленной пролиферации эпителия в сочетании с ослаблением дифференцировки более высокоспециализированных клеток (главных и обкладочных).

Анализ показателей ХМЛ гомогенизированных гастробиоптатов больных с ГЛПС показал статистически значимую связь между удельными объемами лимфоидно-макрофагальных клеточных инфильтратов и уровнем генерации свободных радикалов Ssp (rs = 0,94; p < 0,0048), некрозированных участков СОЖ и Ssp (rs = 0,88; p < 0,0018), кровоизлияний и Ssp (rs = 0,93; p < 0,0077), а также между количеством эрозий и Ssp (rs = 0,91; p < 0,011).

Таким образом, исследование гастробиоптатов при ГЛПС в разгар заболевания выявило прямые статистически значимые связи между удельными объемами воспалительных клеточных инфильтраций, некрозов, кровоизлияний и количеством эрозий с показателями свободно-радикального окисления (Ssp), которые объективно отражают степень структурных изменений и перестройку в СОЖ при данном вирусном повреждении.

Список литературы:

1. Автандилов, Г. Г. Введение в количественную патологическую морфологию / Г. Г. Автандилов. – М.: Медицина, 1980. – 216 с.
2. Арутюнян, А. В. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма: методические рекомендации / А. В. Арутюнян, Е. Е. Дубинина, Н. Н. Зыбина. – СПб., 2000. – 198 c.
3. Евсеев, А. Н. Морфологические изменения в почках при ГЛПС / А. Н. Евсеев // Актуальные вопросы патологической анатомии: материалы Дальневост. науч.-практ. конф., Владивосток, 25–27 мая 2011 г. / под ред. Ю. В. Каминского. – Владивосток: Медицина ДВ, 2011. – С. 119–121.
4. Пат. 2245104 Российская Федерация. Способ прогнозирования возникновения эрозивно-язвенных поражений желудка при геморрагической лихорадке с почечным синдромом / Евсеев А. Н., Тимошин С.С. – опубл. 27.01.05.
5. Евсеев, А. Н. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом. Пато и морфогенез, макро и микроскопическое исследование: моногр. / А. Н. Евсеев. – Хабаровск: ООО «Омега Пресс», 2010. – 296 с.
6. Сиротин, Б. З. Очерки изучения геморрагической лихорадки с почечным синдромом: моногр. / Б. З. Сиротин. – Хабаровск: РИОТИП, 2005. – 194 с.