Методика получения ДНК, пригодной для молекулярно-генетического исследования, из гепаринизированных образцов крови

Д.б.н., проф. П.Л. ИВАНОВ, эксп. С.Н. ЛЕОНОВ

Российский центр судебно-медицинской экспертизы (дир. — проф. В.В. Колкутин) Минздравсоцразвития России, Москва

Гепарин, который традиционно используют в качестве антикоагулянта для препаратов крови, является одним из мощных ингибиторов полимеразной цепной реакции. Препараты ДНК, полученные из гепаринизированных образцов, оказываются проблемными для судебно-экспертного молекулярно-генетического анализа. В своей практике мы столкнулись с необходимостью молекулярно-генетического исследования образцов крови, в которую был добавлен гепарин. Освободить выделенную из этих образцов ДНК от присутствия и ингибирующего действия гепарина известными методами не удалось. В настоящей работе для получения из гепаринизированных образцов крови препаратов ДНК, пригодной для молекулярно-генетического исследования, разработана специальная методика, которая предусматривает предварительную стадию выделения и очистки клеточной фракции крови.

Ключевые слова: молекулярно-генетическая экспертиза, экстрагирование ДНК, полимеразная цепная реакция, ингибиторыполимеразной цепной реакции, гепарин.

A method for preparation of DNA suitable for medico-genetic studies from heparinized blood samples

P.L. IVANOV, S.N. LEONOV

Heparin traditionally used as an anticoagulant for blood preparations is one of the most powerful inhibitors of the polymerase chain reaction. The molecular genetic analysis for the purpose of forensic medical expertise encounters difficulties when DNA preparations obtained from heparinized samples have to be used. In our practical work, we were faced with the necessity to use heparin-treated blood samples. It turned out impossible to eliminated heparin from DNA isolated from these samples by the known methods. In order to obviate this difficulty, we have developed a special method for obtaining DNA from heparinized blood preparations suitable for the purpose of forensic medical expertise. The new technique includes the stages of preliminary extraction and purification of the blood cell fraction.

Key words: molecular genetic expertise, extraction of DNA, polymerase chain reaction, inhibitors of polymerase chain reaction, heparin.