Использование вертикального диск-электрофореза в полиакриламидном геле для определения групп гаптоглобина в жидкой крови

В биологическом отделении Республиканского бюро судебно-медицинской экспертизы Министерства здравоохранения УССР для определения групп гаптоглобина в сыворотке крови при экспертизах спорного отцовства, материнства и замены детей используется метод вертикального электрофореза в полиакриламидном геле.

Мы готовили 7,5% (либо 6%) мелкопористый гель по рецептам, изложенным в инструкции к прибору вертикального диск-электрофореза «Модель-69» производства фирмы «Реанал» (Венгерская Народная Республика). После полимеризации геля в течение * 30—40 мин в трубки наслаивали испытуемую сыворотку, предварительно соединенную с гемоглобином. Для большей концентрации белков сыворотки готовили на 40% растворе сахарозы с добавлением красителя бромфенолового синего. Испытываемые и контрольные донорские сыворотки наслаивали на гель в количестве 0,1 мл. В качестве электродного буфера использовали трисбуферный раствор с pH 8,3 (рецепт буфера изложен в инструкции к прибору). Электрофорез длился в течение 1 ч 20 мин при силе тока 40—60 мА (из расчета по 4 мА на каждую трубку).

Окрашивали извлеченный из трубок гель, опуская его в 0,5% раствор бензидина » 10% уксусной кислоте и добавляя в последующем 1 каплю пергидроля. Результаты учитывали в течение нескольких минут после окраски. Во всех экспертизах было получено четкое разделение полос, соответствующих фракциям гаптоглобина. Сомнительных результатов не наблюдалось.

При необходимости сохранения гелевых столбиков, окрашенных с помощь» бензидиновой реакции, они могут быть помещены в консервант (7% раствор уксусной кислоты, глицерин и др.) и сфотографированы.

Результаты проведенных исследований позволяют рекомендовать этот метод для практической работы ¹.

¹ Прим. редакции. Метод определения группы гаптоглобина путем диск-электрофореза в акриламидном геле был внедрен в практику Н.Н. Старостиным (Суд.-мед. эксперт., 1974. т. 17, № 3, с. 21). Автор занимался лишь апробацией этого способа.