Диагностические возможности антислюнных сывороток анти-А и анти-В в реакции абсорбции — элюции

Совокупность результатов ранее осуществленных экспериментальных исследований и экспертного применения в реакции абсорбции агглютининов позволила установить следующие преимущества анти-слюнных сывороток (АС) перед изосыворотками и гетероиммунными анти-эритроцитарными сыворотками. АС, так же как и антиэритроцитарные, менее подвержены влиянию загрязненных предметов-носителей, чем изосыворотки. АС не менее авидны к пятнам крови, чем антиэритроци-тарные и изосыворотки. Напротив, к пятнам слюны и спермы авидность АС превышает авидность антиэритроцитарных и приблизительно равна авидности изосывороток. Помимо этого, у разных серий АС не наблюдается такого большого колебания авидитета, как у изосывороток (Т.М. Масис, 1962, 1969). Титр АС анти-А выше титра антиэритроцитарных и большинства изосывороток, титр АС анти-В в среднем равен титру антиэритроцитарных и несколько выше титра изосывороток при титровании на плоскости ¹.

Производство АС экономичнее и быстрее антиэритроцитарных.

Диагностические возможности АС в реакции абсорбции — элюции (РАЭ) оставались невыясненными, что и составило цель данной работы.

Материал и метод. Изучены 3 серии кроличьих АС анти-А с титром 1:256—1:1024 и 4 серии бараньих АС анти-В с титром 1:128, 1:512, изготовленные для пробирочного метода с центрифугированием и микроскопическим учетом результатов гемагглютинации. Использовали по 15 образцов пятен крови и слюны давностью 3—4 мес и пятна слюны от тех же лиц, предварительно кипяченые 10 мин в дистиллированной воде с pH 7,4. Образцы крови были получены от лиц групп 0, A₁, А₂, В, A₁B, А₂В, образцы слюны —от выделителей и невыделителей всех групп.

К 2 нитям пятна и контрольной марли длиной 3—5 мм, помещенным в пробирки добавляли по 0,05 мл сыворотки. Абсорбцию осуществляли 21 ч при 4—8°С. Затем нити отмывали 6 раз охлажденным физиологическим раствором с просушиванием на фильтровальной бумаге. Элюцию проводили в пробирках при 56°С в 2 капли физиологического раствора в течение 25 мин. К элюату добавляли 1 каплю 1% взвеси стандартных эритроцитов группы Ai или В и центрифугировали 4 мин при 1500 об/мин. Результаты учитывали невооруженным глазом и с помощью микроскопа на предметных стеклах под покровными.

Реакцию абсорбции агглютининов осуществляли общепринятым способом.

Результаты исследований. Во всех образцах крови антигены А и В были выявлены всеми изученными сыворотками. Побочное связывание отсутствовало. Не было установлено различий выраженности агглютинации в зависимости от серий сывороток. Прослеживалось влияние выраженности антигена А на ослабление агглютинации в ряду А₁, А₂, A₁B, А₂В. Результаты реакции были почти одинаковыми с пятнами крови групп В, A₁B, А₂В.

В одном из 2 образцов группы А₂В антиген А₂ был выявлен так же отчетливо, как антиген A₁ в группе А. В реакции абсорбции антиген А₂ этого образца снижал титр сыворотки анти-А на 1—2 ступени поглощения. Следует отметить, что антиген В в пятне крови этого донора был обнаружен как в РАЭ, так и в реакции абсорбции.

Антигены А и В были отчетливо установлены во всех пятнах слюны выделителей. Побочного связывания не наблюдали. Агглютинация при исследовании обработанных кипячением пятен слюны всегда была слабее, чем при исследовании нативных пятен.

Сыворотки анти-А не реагировали с антигеном А пятен слюны не-выделителей.

Две из 4 сывороток анти-В обладали способностью выявлять антиген В в пятнах слюны невыделителей.

Таким образом, антислюнные сыворотки анти-А и анти-В могут быть использованы в экспертных целях не только в реакции абсорбции, но и в РАЭ.

Несмотря на то что ни одна из 3 испытанных серий сыворотки анти-А не позволяла выявлять антиген слюны невыделителей, нельзя исключить предположения, что некоторые эти сыворотки будут реагировать с выделениями невыделителей. Основанием к этому предположению являются ранее полученные одним из нас (М.В. Мишакова, 1957) данные о более интенсивном абсорбировании пятнами слюны невыделителей антител анти-А АС, чем изоагглютинина α. Если в распоряжении эксперта будут АС, реагирующие с выделениями невыделителей, их применение, по-видимому, будет более целесообразным, чем изосывороток, особенно в случаях выраженного влияния предмета-носителя. Если у эксперта будут АС, позволяющие выявлять антигены только в выделениях выделителей, параллельное применение АС и изосывороток позволит одновременно установить группу выделения и категорию выдели-тельства.

Учитывая несомненную необходимость внедрения АС в судебно-медицинскую практику, сотрудники сывороточного отдела Научно-исследовательского института судебной медицины Министерства здравоохранения СССР составили техническую документацию на производство АС анти-А и анти-В, которая в 1976 г была утверждена Комитетом вакцин и сывороток при Министерстве здравоохранения СССР.

¹ Антислюнные кроличьи сыворотки анти-А и анти-В изготовлены М.В. Мишаковой (1957), баранья сыворотка анти-В — Н. А. Соловьевой (1974). АС были положительно апробированы в Бюро судебно-медицинской экспертизы Краснодара, Чебоксар, Петрозаводска, Вильнюса, Оренбурга и в отделе судебно-медицинского исследования вещественных доказательств Научно-исследовательского института судебной медицины Министерства здравоохранения СССР.