Установление агглютининов α и β в слюне

При судебномедицинских экспертизах широко применяется определение агглютиногенов изосерологической системы АВ0 в слюне. Методика таких определений хорошо разработана. Однако до настоящего времени в судебномедицинских лабораториях нашей страны не производились исследования по выявлению в слюне групповых агглютининов α и β. В недавно опубликованной монографии А.К. Туманова по судебномедицинскому исследованию вещественных доказательств (1961) мы не нашли никаких упоминаний по этому поводу. В руководстве М.А. Бронниковой (1947) по этому вопросу отмечено, что в некоторых случаях в выделениях человеческого организма, в частности в слюне, обнаруживаются агглютинины α и β. Впервые этот вопрос разработали японские исследователи, которые отметили, что слюна в зависимости от группы крови во многих случаях содержит агглютинины α, β. Судя по наличию или отсутствию агглютининов в слюне, людей предложено разделять на «выделителей» (v) и «невыделителей» (V). По данным Фурухата, Накамура, Накаяма и Сузуки, «выделительство» в слюне групповых агглютининов α и β наблюдается в 73,8—76,1%, «невыделительство» — в 23,9—26,2%. Титр агглютининов в слюне чаще бывает в пределах 1:4—1:16, но он может и достигать 1:32—1:64. Зависимости между «выделительством» групповых агглютининов и агглютиногенов изосерологической системы АВ0 не имеется.

По данным тех же авторов, способность выделения групповых агглютининов передается по наследству. В результате посемейного обследования установлена следующая зависимость в наследственной передаче «выделительства» групповых агглютининов (см. таблицу).

Наследование «выделительства» агглютининов

В некоторых странах наследственные свойства «выделительства» групповых агглютининов используются в делах о спорном отцовстве. При посещении Берлинского института судебной медицины, возглавляемого проф. Прокопом, мы были свидетелями широкого применения в этих целях установления «выделительства» агглютининов, определямого по слюне.

Описанная в литературе методика исследования агглютининов в слюне несложна. К одной капле слюны прибавляют одну каплю 2% взвеси стандартных эритроцитов группы А или группы В в зависимости от группы крови. Реакция агглютинации происходит при комнатной температуре в течение 45 минут. Для выявления титра агглютининов применяют кратное разведение слюны физиологическим раствором. В случае необнаружения агглютининов слюну перед реакцией выпаривают в водяной бане при 50° до 1/8 первоначального объема, а затем разбавляют в 2 раза физиологическим раствором, после чего определяют титр агглютининов.

Данная работа имеет своей целью проверку имеющихся в литературе сведений о наличии агглютининов α и β в жидкой слюне и решение вопроса о возможности обнаружения их в пятнах слюны.

Мы провели выявление агглютининов в жидкой слюне 10 человек: 2 — группы 0(1), 5 — группы А(II) и 3 — группы В (III). Все они являлись «выделителями» групповых агглютиногенов, что установлено путем исследования слюны. Слюну центрифугировали; для испытания использовали ее верхние прозрачные слои. Затем в агглютинационных пробирках делали кратное разведение слюны физиологическим раствором до 1:128 и в каждую из них на 2 капли разведенной слюны добавляли по одной капле свежеприготовленной 3% взвеси стандартных эритроцитов группы А или группы В, после чего содержимое смешивали легким встряхиванием. Реакция агглютинации происходила при комнатной температуре в течение часа. По истечении этого срока содержимое каждой пробирки переносили на предметные стекла и рассматривали под микроскопом.

При попытке центрифугирования пробирок перед учетом данных реакции агглютинации результаты были менее отчетливыми, так как происходило связывание эритроцитов слюной, часто тягучей консистенции, что затрудняло разбивание осадка эритроцитов путем встряхивания пробирок.

Пять образцов слюны 0(1) и В(III) групп агглютинировали стандартные эритроциты группы А, 6 образцов слюны группы 0(1) и А(II) — стандартные эритроциты группы В. Титр агглютининов в слюне колебался от 1:4 до 1:64. С одним образцом слюны группы А (II) агглютинации эритроцитов группы В не произошло. Выпаривание слюны не производили.

В контрольных исследованиях при взаимодействии слюны группы А(II) со стандартными эритроцитами группы А и слюны группы В (III) со стандартными эритроцитами группы В агглютинации эритроцитов не наблюдалось.

Проведены исследования тех же образцов жидкой слюны после хранения их в течение 3, 5 и 7 дней при 7°. Во всех случаях агглютинины сохранились, но титр их был снижен на 1—2 ступени.

Пятна слюны исследовали методом покровного стекла по Ляттесу. Предварительно проверенную фильтровальную бумагу, не оказывавшую воздействия на стандартные эритроциты групп А и В, пропитывали жидкой слюной с уже установленным титром агглютининов α и β. Затем бумагу высушивали при комнатной температуре. Исследовали пятна слюны давностью 1, 3 и 5 дней. Кусочки фильтровальной бумаги, пропитанные слюной, помещали на предметные стекла под покровные и заливали 0,5% взвесью свежих стандартных эритроцитов группы А или группы В. Контролем служила реакция с эритроцитами группы 0. Было взято 5 образцов слюны в пятнах групп 0(I) и В(III) для определения агглютинина а и 6 образцов слюны в пятнах групп 0 (I) и А(II) для определения агглютинина β. Во всех 5 образцах, высушенной слюны, хранившейся сутки, обнаружен агглютинин а, в 4 образцах из 6 — агглютинин β. Наличие последнего не установлено в 2 образцах слюны А (II) группы, где первоначальный титр агглютинина β, как показали испытания жидкой слюны, был 1:4. Агглютинация стандартных эритроцитов хорошо проявлялась уже через 15—20 минут, причем в некоторых случаях возникали крупные конгломераты эритроцитов.

В пятнах слюны, хранившихся в условиях комнатной температуры в течение 3—5 дней, агглютинины тоже были определены, но не во всех случаях: не выявлены агглютинины с первоначальным титром 1:4—1:8.

Установление агглютининов α и β в жидкой и высохшей слюне расширяет возможности судебномедицинского исследования вещественных доказательств.

Судя по сведениям, имеющимся в литературе, использование степени «выделительства» агглютининов, устанавливаемого по слюне, в некоторых случаях может способствовать более точному разрешению вопросов о спорном отцовстве и материнстве и о возможности происхождения ребенка от тех или иных родителей. Определение групповых агглютининов в пятнах слюны может оказаться полезным и при исследовании окурков папирос, почтовых конвертов, предметов, используемых в качестве кляпа, т. е. всюду, где эксперт устанавливает наличие слюны. Подобные исследования имеют такое же практическое значение, как определение агглютининов α и β в пятнах крови.

Выводы

1. Экспериментально проверена достоверность имеющихся в литературе сведений о том, что в слюне человека содержатся агглютинины α и β.

В нашем материале в слюне одного «выделителя» агглютиногена α агглютинин β не был обнаружен, что до некоторой степени может служить подтверждением наблюдений ряда авторов о разделении людей по групповым агглютининам на «выделителей» и «невыделителей» и об отсутствии зависимости между «выделительством» агглютининов и агглютининов изосерологической системы АВ0.

2. Агглютинины в слюне сохраняются в течение нескольких дней, но титр их при этом снижается.

3. Установлена возможность выявления агглютининов α и β в пятнах слюны методом покровного стекла по Ляттесу.

4. По литературным данным, способность «выделять» групповые агглютинины является наследственным признаком и может быть использована в делах о спорном отцовстве, материнстве и замене детей.