Определение изониазида в трупной крови и плазме методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с диодно-матричным детектором

Определение изониазида в трупной крови и плазме методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с диодно-матричным детектором

А. Б. Мелентьев¹, А. В. Лаврентьева ²

¹Судебно-химическое отделение областного бюро судебно-медицинской экспертизы (нач. бюро — к.м.н. Е.Ф. Швед), ²Химико- токсикологическая лаборатория областной клинической больницы (глав. врач — к.м.н. М.В. Бавыкин), Челябинск

Описана аналитическая процедура для экспрессного определения изониазида в трупной крови или плазме с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии с диодно-матричным детектором. Методика предназначена для токсикологических и судебно-химических анализов. Пробоподготовка включает осаждение белков трихлоруксусной кислотой, образование производного изониазида с коричным альдегидом и хроматографический анализ на колонке Eclipse XDB-C18 с регистрацией при 340 нм. Элюент - метанол - 0,05 М буфер ацетата аммония с рН 3,8 (50:50 по объему). Предел обнаружения в плазме 0,5 мкг/мл, в гемолизированной крови 1 мкг/мл. Диапазон количественного определения от 2 до 200 мкг/мл. Относительное среднеквадратичное отклонение не превышает 12% для концентраций 2 и 50 мкг/мл.

Ключевые слова: изониазид, токсикологический анализ, высокоэффективная жидкостная хроматография

The detection of isoniazide in the cadaveric blood and plasma by high performance liquid chromatography with a diode matrix detector

A.B. Melent'ev, A. V. Lavrent'eva

The authors describe the analytical procedure for the rapid detection of isoniazide in the cadaveric blood and plasma using high performance liquid chromatography with a diode matrix detector (HPLC-DAD). The method is designed for toxicological and forensic medical analyses. The preliminary preparation of the samples includes protein precipitation with trichloroacetic acid, formation of isoniazide derivatives with cinnamic aldehyde, and chromatographic analysis on an Eclipse XDB-C18 column with registration of absorption at a wavelength of 340 nm. The mobile phase is a mixture of methanol and 0.05 M ammonium acetate buffer (50:50 v/v), pH 3.8. The detection limit is 0.5 mcg/ml in plasma and 1 mcg/ml in blood hemolizate. The qualitative determination is possible in a concentration range from 2 to 200 mcg/ml. Mean square deviation does not exceed 12% in a concentration interval from 2 to 50 mcg/ml.

Keywords: isoniazide, toxicological analysis, high performance liquid chromatography